Annexin V binding assays

annexin V是35–36 kilodalton, Ca2+ -dependent磷脂結合蛋白，其對磷脂醯絲氨酸(phosphatidylserine，PS)具有高親和力。 在正常存活的細胞中，PS位於細胞質內的細胞膜表面。在凋亡早期，細胞PS從質膜的內部轉移到外部，使PS暴露細胞外部環境，可通過annexin V conjugate檢測暴露於細胞外的PS。更多詳情>> eGFP Annexin V and PI Apoptosis Kit
FITC Annexin V and PI Apoptosis Kit
Andy Fluor™ 488 Annexin V and PI Apoptosis Kit
Apoptotic, Necrotic, and Healthy Cells Detection Kit
Annexin V Conjugates
 

Caspase activity assays

 

Mitochondrial membrane potential assays

此試劑盒含有JC-1染料和分析緩衝液，用於偵測細胞凋亡中期之粒線體膜電位失衡現象。

為什麼會出現粒線體膜電位變化？
粒線體是早期細胞毒性、氧化壓力和細胞凋亡的重要胞器之一。粒線體使用氧氣合成ATP，為活細胞產生必需的能量。已知粒線體的活性降低和功能障礙、癌症、衰老和神經退化性疾病例如阿茲海默症與帕金森氏症密切相關。
JC-1被廣泛用於觀察粒線體膜電位，根據粒線體膜電位不同，會顯示從綠色(530 nm)到紅色(590 nm)的螢光特徵變化。

偵測原理
在膜電位正常的健康粒線體中，JC-1以多聚體(polymer)形式存在，並且發出紅色螢光。當粒線體膜電位降低時，JC-1會變成單體(monomer)，並且發出綠色螢光。紅色/綠色螢光強度比可當作評估粒線體狀況的指標。
  第一次使用就上手

解決傳統JC-1難以溶解的問題 - 此試劑盒中的JC-1為水溶性，易溶解

兼容多樣化平台 - 兼容流式細胞儀、螢光顯微鏡以及盤式分析儀，提供每種平台的實驗範例



附有影像緩衝液(Imaging Buffer) - 含有HEPES，可在分析過程中長時間維持細胞最佳狀態，並且可降低螢光背景


以螢光顯微鏡檢測FCCP處理後的HeLa細胞粒線體膜電位
使用carbonylcyanide-р-trifluoromethoxyphenylhydrazone(FCCP)處理HeLa細胞，使粒線體膜去極化，並用此試劑盒評估膜電位的變化。以螢光顯微鏡檢測結果顯示，未處理的細胞中粒線體染色為紅色，而用FCCP處理的細胞顯示粒線體膜電位降低，紅色螢光減少。

以螢光顯微鏡檢測FCCP處理後的HeLa細胞粒線體膜電位。
FCCP：去極化試劑，使粒線體膜電位降低。

實驗條件​
JC-1 濃度：2 μmol/l in MEM,  染色時間：30 min
FCCP 濃度：100 μmol/l, FCCP 處理時間：1 h
偵測條件
Green：Ex 488 nm / Em 500-550 nm 
Red：Ex 561 nm / Em 560-610 nm
Scale Bar : 20 μm

簡易實驗操作步驟
只需在細胞中加入染色試劑，即可經由簡單的操作進行染色。以JC-1 working solution孵育細胞30分鐘後，利用各種偵測平台檢測結果。


檢測誘導凋亡Jurkat細胞的粒線體膜電位

1. 用Staurosporine誘導Jurkat細胞凋亡
2. 以JC-1 working solution孵育細胞30分鐘
3. 以螢光顯微鏡觀察細胞，並使用plate reader以及流式細胞儀進行分析

螢光顯微鏡細胞影像
通過清楚地成像，可見到因凋亡誘導而改變的膜電位的顏色變化

偵測條件
Green：Ex 488 nm / Em 500-550 nm 
Red：Ex 561 nm / Em 560-610 nm
Scale Bar : 80 μm

微量盤式分析儀分析結果
確認well中所有細胞的膜電位變化(多個樣本處理)

偵測條件
Green：Ex 488 nm / Em 515-545 nm
Red：Ex 488 nm / Em 564-604 nm

流式細胞儀分析結果
定量分析個體細胞膜電位的變化

偵測條件
Green：Ex 485 nm / Em 525-545 nm
Red：Ex 535 nm / Em 585-605 nm

Kit可用分析次數​

螢光顯微鏡	流式細胞儀	Plate Reader
25 dishes (35 mm dish)	100次	5 plates  (96-well plate)

 
產品資訊

Cat. No.	Product	Size
MT09	JC-1 MitoMP Detection Kit	1 set

TUNEL assays