LNP-mRNA疫苗的優勢

許多已建立的疫苗包含了減毒形式的病原體，這意味著這類疫苗通常能夠引發記憶性CD8 T 細胞。但是，開發此類產品的複雜性導致這類疫苗在COVID-19等大流行情況下無法快速應用。相較之下，設計和製造LNP-mRNA疫苗要簡單得多，正如SARS-CoV-2 mRNA有效疫苗的快速開發所證明的那樣。LNP-mRNA疫苗的進一步優勢是它們在進入細胞後很容易被轉譯，沒有整合到基因組中的風險，並且含有較少的可能產生不需要的免疫反應的外來成分。熱衷於利用這些好處的研究人員現在正在研究LNP-mRNA疫苗如何發揮其作用。

LNP-mRNA疫苗引發保護性CD8 T 細胞

Knudson等人先前已經證明胜肽-樹突細胞免疫誘導的記憶CD8 T細胞可以保護小鼠免受鼠痘病毒(ECTV)攻擊。因此使用相同的ECTV模式來確定LNP-mRNA疫苗是否可以提供相同的保護作用。為了實現這一目標，他們用含有不同劑量的LNP-mRNA (未修飾或N1-Methylpseudo-UTP修飾的ECTV EVM158  mRNA)對小鼠進行免疫接種，並通過流式細胞儀監測CD8 T細胞反應。儘管兩種類型的mRNA的結果相當，但發現未修飾形式的mRNA會在接種位置產生不利影響。最重要的是，使用10 μg的N1-Methylpseudo-UTP修飾mRNA進行單次免疫接種可以保護易感品系的小鼠免於鼠痘，而加強接種增加了記憶CD8 T 細胞進而提供了全面性保護。

TriLink的產品用於製備研究中使用的修飾mRNA。將ECTV EVM158基因clone到mRNA 生產用plasmid中後，轉錄得到的mRNA，然後將UTP替換為N1-Methylpseudo-UTP，並使用CleanCap生成cap1結構。然後將純化的mRNA包覆在LNP中用於肌內註射。

原始文章>> Lipid Nanoparticle-encapsulated mRNA Vaccines Elicit Protective CD8 T Cells
 

Article Reference: Knudson CJ, Alves-Peixoto P, Muramatsu H, Stotesbury C, Tang L, Lin PJC, Tam YK, Weissman D, Pardi N, Sigal LJ, Lipid-nanoparticle encapsulated mRNA vaccines induce protective memory CD8 T cells against a lethal viral infection, Molecular Therapy (2021), doi: https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2021.05.011 

特色產品：

● Capping效率高(~95%)且能夠產生活性更高的mRNA
● 產生天然Cap 1結構，減少對宿主先天免疫系統的刺激
● 使用 "one pot" 共轉錄反應產生Cap 1結構，相比酵素法Cap純化步驟減少




N1-Methylpseudouridine-5'-Triphosphate

N1-Methyl-Pseudouridine-5'-Triphosphate是一種修飾UTP，可使用在IVT以產生具有修飾的mRNA，N1-Methylpseudo-UTP的摻入可以降低mRNA的免疫原性。